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甲砜霉素的介绍

甲砜霉素(Thiamphenicol),别名硫霉素,甲砜氯霉素。该品为白色结晶性粉末,无臭。在二甲基甲酰胺中易溶,在无水乙醇中略溶,在水中微溶。熔点 该品的熔点为163~167℃。甲砜霉素是氯霉素的同类物,抗菌谱和抗菌作用与氯霉素相仿,具广谱抗微生物作用,包括需氧革兰阴性菌及革兰阳性菌、厌氧菌、立克次体属、螺旋体和衣原体属。甲砜霉素对流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌具杀菌作用。


有关甲砜霉素的食品安全限量规定

GB 29689-2013 食品安全国家标准规定甲砜霉素最大限量为0.05 mg/kg.逗点生物开发出使用SPE方法检测鱼肉中甲砜霉素的含量,平均回收率在83.33%,为客户提供关于甲砜霉素检测有效的解决方案。


一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法,HPLC法作为分析方法,检测鱼肉甲砜霉素的含量。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。


二、实验目标物

甲砜霉素(CAS:15318-45-3)


三、应用范围

本方法适用于鱼肉中甲砜霉素检测的HPLC检测及确证。


四、实验材料   

biocommaCopure C18固相萃取柱500 mg/6 mL (Cat. No. COC186500)  


五、实验方法

1、样品提取

取均质后鱼肉5.0 g(精确到0.01 g)到50 mL离心管,加6 g无水硫酸钠,再加10 mL乙腈,超声5 min,振荡5 min,于4000 r离心5 min取上清液8 mL到15 mL离心管,氮吹干。加5 mL水溶解,再加5 mL正己烷除脂,涡旋混匀,于4000 r离心3 min,上层有机相弃去,分层处正己烷用氮气吹干,下层待净化。


2、SPE柱活化

(1)活化:加5 mL甲醇活化, 5 mL水平衡,弃去流出液;

(2)上样和淋洗:加入待净化溶液,弃去流出液;再加10 mL水淋洗,弃去流出液,抽干小柱;

(3)洗脱:加入8 mL甲醇洗脱,收集流出液,氮气吹干;

(4)重新溶解:用1 mL 20%乙腈水溶解。经0.22 μm滤膜重新过滤,供高效液相色谱测定。 

 

3、HPLC条件  

  备:Waters Alliance 2695

色谱柱Ultimate XB-C8( 250 mm×4.6 mm,5 μm)

检测器:Waters 2487 紫外检测器

检测波长:224 nm

流动相:A: 乙腈   B: 水

1 等度洗脱条件

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流速:1.0 mL/min   

进样体积:20 μL


六、实验结果

1、0.064mg/kg鱼肉中甲砜霉素的添加回收结果

2  0.064 mg/kg鱼肉中甲砜霉素的添加回收结果

fish3.png2、添加水平为0.064 mg/kg甲砜霉素检测的液相色谱图

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1  添加水平为0.064mg/kg甲砜霉素检测的液相色谱图

 

结论:鱼肉中甲砜霉素检测的平均回收率是83.33%,RSD是2.71%,满足标准要求。